科研用黄曲霉定量elisa试剂盒(大豆凝集素检测ELISA)
科研用黄曲霉定量elisa试剂盒(大豆凝集素检测ELISA)30×浓缩样本提取液:50mL样本在前处理过程中稀释了 3000 倍,校准品实际浓度为设定浓度的 1/3000,计算结果无需再乘以稀释倍数检测范围:0.2mg/g~12mg/g反应温度:37℃ 反应时间:30min校准品 1~5 设定浓度分别为:0mg/mL、0.2mg/mL、0.8mg/mL、3mg/mL、12mg/mL。
什么是大豆凝集素?为什么要检测大豆凝集素?大豆凝集素是属于大豆抗营养因子中的一种,非免疫球蛋白本质的蛋白或糖蛋白,他能特异性识别并可逆结合复杂糖复合物中的糖链而不改变所结合糖基的共价键结构。指能与N-乙酰基半乳糖胺/半乳糖特异结合的糖蛋白约占蛋白质的3%,120KDa 四聚体,在小肠中有50%-60%不被降解。能与细胞表面的特殊糖蛋白和寡糖结合,凝集红血球,破坏肠壁,抑制消化,对免疫系统有毒害作用。
所以饲料企业或者饲料发酵企业在研发和生产过程中需要对大豆凝集素做检测,以防对幼畜动物的成长造成不可逆的危害
大豆凝集素检测ELISA 试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔条上预包被大豆凝集素(SBA)抗原,样本中的 大豆凝集素和预包被的抗原竞争大豆凝集素抗体,加入酶标二抗后,用 TMB 底物显色,样本吸光度值与其所含大豆凝集素的含量呈负相关,与标准曲线比较即可得出样本中大豆凝集素的含量。
大豆凝集素检测ELISA 试剂盒样本类型大豆及其深加工产品(如:豆粕、发酵豆粕、膨化大豆、大豆分离蛋白、大豆浓缩蛋白等)
大豆凝集素检测ELISA 试剂盒技术参数检测范围:0.2mg/g~12mg/g
反应温度:37℃ 反应时间:30min
校准品 1~5 设定浓度分别为:0mg/mL、0.2mg/mL、0.8mg/mL、3mg/mL、12mg/mL。
样本在前处理过程中稀释了 3000 倍,校准品实际浓度为设定浓度的 1/3000,计算结果无需再乘以稀释倍数
30×浓缩样本提取液:50mL
KTI/SBA 样本稀释液:100mL
20×浓缩洗液:50mL
大豆凝集素 检测板:96T
大豆凝集素 校准品(1~5):各 1.5mL
大豆凝集素抗体工作液:8mL
大豆凝集素 酶标试剂:14mL
显色液:14mL
终止液:14mL
盖板膜 3 张、
质检报告 1 份
说明书 1 份
大豆凝集素检测所需材料酶标仪(450、630nm 滤光片)、天平(感量 0.01g)、粉碎机、60 目筛网、摇床、离心机、洗板机/洗瓶、移液器及枪头(量程 10~100μL 及 100~1000μL)、量筒、50mL 离心管、2mL 离心管、加样槽、吸水纸、计时器、蒸馏水
大豆凝集素检测简易操作步骤1. 提取:称取样本 0.30g 加 30mL1×样本提取工作液,25℃提取 16h
2. 稀释:4000rpm 离心 5min,用样本稀释液稀释 30 倍,混匀待检
3. 加样:加入校准品/待测样本 50μL,抗体工作液 50μL,37℃孵育 10min
4. 洗板:用 1×洗涤工作液洗板 4 次,拍干
5. 加酶:加入酶标试剂 100μL/孔,37℃孵育 10min
6. 洗板:用 1×洗涤工作液洗板 4 次,拍干
7. 显色:加入显色液 100μL/孔,37℃孵育 10min
8. 终止:加终止液 100μL/孔,酶标仪读数
9. 计算:数据带入计算软件
大豆凝集素检测ELISA试剂盒贮藏方法及有效期2~8℃干燥保存,有效期 12 个月